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ECOTOP
廣州億濤生物科技公司（ECOTOP SCIENTIFIC(Guangzhou) BIOTECHNOLOGY），由中山大學生命科學領域?qū)I(yè)人士和業(yè)內(nèi)專業(yè)營銷人才共同組建成立?！俺掷m(xù)改善動物及人類健康”是公司的愿景，自成立以來一直潛心研究、注重細節(jié)，專注于打造高品質(zhì)、標準化的生物相關產(chǎn)品。目前，ECOTOP SCIENTIFIC產(chǎn)品線涵蓋了分子生物學、細胞生物學、免疫學等領域，涉及NGS伴隨診斷行業(yè)、畜牧行業(yè)、水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)、高?？蒲械刃袠I(yè)。
通用型SDS-PAGE蛋白電泳配膠試劑盒-250塊膠
基本售價：600.00元
SDS-PAGE Gel Preparation Kit產(chǎn)品介紹SDS-PAGE 蛋白電泳制膠試劑盒提供了配制 SDS-PAGE 凝膠所需的各種試劑，用戶只需自備制膠器具和蒸餾水，即可配制 PAGE 膠(即聚丙烯酰胺凝膠)。SDS-PAGE 凝膠配制試劑盒不僅可用于配制 SDS-PAGE凝膠，也可用于配制非變性(native)PAGE 凝膠。本試劑盒約可配制 30-50 塊常規(guī)大小的 PAGE 膠存儲條件1M Tris-HCl pH8.8、10% SDS、凝膠聚合催化劑（粉末狀態(tài)）和 1M Tris-HCl pH6.8 室溫保存。30% Acr-Bis(29:1)和 TEMED 4℃避光保存。凝膠聚合催化劑加水配制成 10%溶液后，分裝成小管-20℃保存，通常半年內(nèi)有效(建議分次稱量配制)。需要額外準備的材料□ 制膠器具□ 去離子水開始前試劑準備? 使用前應配制新鮮的 10%凝膠聚合催化劑溶液，且在-20℃分裝凍存。最優(yōu)是分批使用前配制，盡量不要一次全部配制使用。
Bradford蛋白濃度測定試劑盒-2000T
基本售價：160.00元
Bradford Protein Assay Kit 【包裝規(guī)格】 【保存條件】 BSA 存于-20℃，其它試劑 4℃保存穩(wěn)定 12 個月。【概述】考馬斯亮蘭 G-250 染料，在酸性溶液中與蛋白質(zhì)結(jié)合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由 465nm 變?yōu)?595nm，在一定的濃度范圍內(nèi)，測定的吸光度值 A595 與蛋白質(zhì)濃度成正比。Bradford 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質(zhì)的影響，樣品中巰基乙醇的濃度可高達 1M，二硫蘇糖醇的濃度可高達 5mM，但受略高濃度的去垢劑影響，需確保SDS 的濃度低于 0.1%，Triton X-100 低于 0.1%，Tween 20, 60, 80 低于 0.06%?！臼褂梅椒ā?. 蛋白標準液的準備a. 蛋白樣品在什么溶液中，標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見，如果蛋白樣品所在溶液不含有干擾本試劑盒檢測的物質(zhì)，也可以用 0.9%NaCl、PBS 或水稀釋標準品。蛋白標準液(5mg/ml BSA)如果凍存，請完全融化并混勻后使用。b. 按照下表配制 0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5mg/ml 蛋白標準。每次稀釋時注意充分混勻。如果有必要可以增加設置 0.0625mg/ml 的蛋白標準。2. 蛋白濃度測定a. 取 5μl 不同濃度蛋白標準加到 96 孔板的蛋白標準孔中。b. 取 5μl 樣品到 96 孔板的樣品孔中。如果樣品不足 5μl，需加標準品稀釋液補足到 5μl。請注意記錄樣品體積。c. 各孔加入 250μl G250 染色液。d. 用酶標儀測定 A595，或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度?？梢粤⒓礈y定吸光度，也可以在 2 小時內(nèi)測定，2 小時內(nèi)檢測數(shù)據(jù)無顯著變化。e. 根據(jù)標準曲線和使用的樣品體積計算出樣品中的蛋白濃度?！咀⒁馐马棥?. 本品 BSA 因每次使用量較小，推薦分裝使用。2. 不同 96 板的吸收值會有不同，得到 OD 有區(qū)別為正?，F(xiàn)象（保證數(shù)據(jù)呈線性關系）3. 請使用 96 孔底部透明板（如普通細胞培養(yǎng)板）檢測，最佳波長為 595nm。4. 將 G250 染色液回復至室溫后使用，有利于提高檢測靈敏度。5. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
BCA蛋白濃度測定試劑盒-1000T
基本售價：600.00元
BCA Protein Assay Kit 【保存條件】 BCA 試劑 A 室溫避光保存 1 年 BCA 試劑 B 室溫保存 1 年 蛋白標準品-20℃保存 1 年 【概述】 BCA蛋白濃度測定試劑盒(BCA Protein Assay Kit)是根據(jù)目前世界上最常用的兩種蛋白濃度檢測方法之 一 BCA 法研制而成， 實現(xiàn)了蛋白濃度測定的簡單、高穩(wěn)定性、高靈敏度和高兼容性。靈敏度高，檢測濃 度下限達到 25μg/ml，最小檢測蛋白量達到 0.5μg，待測樣品體積為 1-20μl。在 50-2000μg/ml 濃度范圍內(nèi)有 較好的線性關系。 BCA 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達 5%的 SDS，5%的 Triton X-100，5%的 Tween20、60、80。但本試劑盒受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保 EDTA 低于 10mM，無 EGTA，二硫蘇糖醇(DTT) 低于 1mM，β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于 0.01%。不適用 BCA 法時建議試用本司生產(chǎn)的 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。 【操作方法】 1.配制 BCA 工作液： 依據(jù)樣品數(shù)量，將試劑 A 和試劑 B 按體積比 50:1 配制適量 BCA 工作液，并充分混勻。 注：配制 BCA 工作液前請將試劑 A 搖晃混勻，觀察是否析出結(jié)晶，如若析出結(jié)晶，可 37℃水浴促溶。 2.稀釋蛋白標準品： 蛋白樣品在什么溶液中，標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見，如果蛋白樣品所在溶液不含有 干擾本試劑盒檢測的物質(zhì)，也可以用 0.9%NaCl、PBS 或水稀釋標準品。蛋白標準液(5mg/ml BSA)如果凍存，請完全融化并混勻后使用。具體如下表：3.蛋白濃度的檢測a. 取 5μl 不同濃度蛋白標準加到 96 孔板的蛋白標準孔中。b. 取 5μl 樣品到 96 孔板的樣品孔中。如果樣品不足 5μl，需加標準品稀釋液補足到 5μl。請注意記錄樣品體積。c. 各孔加入 195μl BCA 工作液。 37℃放置 30 分鐘。注:也可以室溫放置 2 小時，或 60℃放置 30 分鐘。BCA 法測定蛋白濃度時，顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫 度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或適當延長孵育時間。d. 用酶標儀測定 A595，或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度。可以立即測定吸光度，也可以在 2小時內(nèi)測定，2 小時內(nèi)檢測數(shù)據(jù)無顯著變化。4.數(shù)據(jù)計算a.以不同濃度的蛋白標準液為橫坐標b. 以不同濃度的蛋白標準測得 OD 值（多孔則為平均 OD）為縱坐標c. 建立線性關系，獲得公式（如右圖中所示(本產(chǎn)品實際檢測)，若測得樣品 OD=0.6 則 0.6=0.4995x+0.4151，計算得濃度 x=0.37mg/ml）【注意事項】1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 不同 96 板的吸收值會有不同，得到 OD 有區(qū)別為正?，F(xiàn)象（保證數(shù)據(jù)呈線性關系）。3. 蛋白標準液（5mg/ml）收到后盡快分裝，避免反復凍融。4. BCA 試劑 A 在低溫環(huán)境下會析出結(jié)晶，可適當 37℃水浴促溶后使用。5. 請使用 96 孔底部透明板（如普通細胞培養(yǎng)板）檢測，最佳波長為 595nm。
BCA蛋白濃度測定試劑盒-200T
基本售價：190.00元
BCA Protein Assay Kit 【保存條件】 BCA 試劑 A 室溫避光保存 1 年 BCA 試劑 B 室溫保存 1 年 蛋白標準品-20℃保存 1 年 【概述】 BCA蛋白濃度測定試劑盒(BCA Protein Assay Kit)是根據(jù)目前世界上最常用的兩種蛋白濃度檢測方法之 一 BCA 法研制而成， 實現(xiàn)了蛋白濃度測定的簡單、高穩(wěn)定性、高靈敏度和高兼容性。靈敏度高，檢測濃 度下限達到 25μg/ml，最小檢測蛋白量達到 0.5μg，待測樣品體積為 1-20μl。在 50-2000μg/ml 濃度范圍內(nèi)有 較好的線性關系。 BCA 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達 5%的 SDS，5%的 Triton X-100，5%的 Tween20、60、80。但本試劑盒受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保 EDTA 低于 10mM，無 EGTA，二硫蘇糖醇(DTT) 低于 1mM，β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于 0.01%。不適用 BCA 法時建議試用本司生產(chǎn)的 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。 【操作方法】 1.配制 BCA 工作液： 依據(jù)樣品數(shù)量，將試劑 A 和試劑 B 按體積比 50:1 配制適量 BCA 工作液，并充分混勻。 注：配制 BCA 工作液前請將試劑 A 搖晃混勻，觀察是否析出結(jié)晶，如若析出結(jié)晶，可 37℃水浴促溶。 2.稀釋蛋白標準品： 蛋白樣品在什么溶液中，標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見，如果蛋白樣品所在溶液不含有 干擾本試劑盒檢測的物質(zhì)，也可以用 0.9%NaCl、PBS 或水稀釋標準品。蛋白標準液(5mg/ml BSA)如果凍存，請完全融化并混勻后使用。具體如下表：3.蛋白濃度的檢測a. 取 5μl 不同濃度蛋白標準加到 96 孔板的蛋白標準孔中。b. 取 5μl 樣品到 96 孔板的樣品孔中。如果樣品不足 5μl，需加標準品稀釋液補足到 5μl。請注意記錄樣品體積。c. 各孔加入 195μl BCA 工作液。 37℃放置 30 分鐘。注:也可以室溫放置 2 小時，或 60℃放置 30 分鐘。BCA 法測定蛋白濃度時，顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫 度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或適當延長孵育時間。d. 用酶標儀測定 A595，或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度?？梢粤⒓礈y定吸光度，也可以在 2小時內(nèi)測定，2 小時內(nèi)檢測數(shù)據(jù)無顯著變化。4.數(shù)據(jù)計算a.以不同濃度的蛋白標準液為橫坐標b. 以不同濃度的蛋白標準測得 OD 值（多孔則為平均 OD）為縱坐標c. 建立線性關系，獲得公式（如右圖中所示(本產(chǎn)品實際檢測)，若測得樣品 OD=0.6 則 0.6=0.4995x+0.4151，計算得濃度 x=0.37mg/ml）【注意事項】1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 不同 96 板的吸收值會有不同，得到 OD 有區(qū)別為正常現(xiàn)象（保證數(shù)據(jù)呈線性關系）。3. 蛋白標準液（5mg/ml）收到后盡快分裝，避免反復凍融。4. BCA 試劑 A 在低溫環(huán)境下會析出結(jié)晶，可適當 37℃水浴促溶后使用。5. 請使用 96 孔底部透明板（如普通細胞培養(yǎng)板）檢測，最佳波長為 595nm。
10% SDS 溶液100ml
基本售價：50.00元
10% SDS Solution 【保存條件】 室溫保存，有效期 1 年 【概述】 SDS 即 Sodium dodecyl sulfate，中文名為十二烷基硫酸鈉。常用生化試劑，用途廣泛，可以用于 SDS-PAGE、細菌堿裂解等。10% SDS 溶液為 100ml 溶液中含有 10g SDS，該溶液用超純水配制，經(jīng) 022μm 濾膜過濾處理。 【注意事項】 1. 環(huán)境溫度較低時，10% SDS 溶液會產(chǎn)生大量白色沉淀，可通過 37℃水浴促溶。 2. 本產(chǎn)品對人體有刺激性，操作時請小心，并注意適當防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。 3. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
30%丙烯酰胺溶液 (29:1)500ml
基本售價：180.00元
30%丙烯酰胺溶液 (29:1)使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-817430% Acr-Bis Solution (29:1)100ml/500ml使用說明書 1份 【保存條件】 4℃避光保存，有效期1年 【概述】 30% Acr-Bis Solution (29:1) 即為含30% acrylamide-bisacrylamide的水溶液，其中acrylamide和bisacrylamide的比例為29:1。 30% Acr-Bis Solution (29:1) 常用于配制丙烯酰胺凝膠(PAGE膠)，包括SDS-PAGE膠等，可以用于蛋白或核酸的分離。聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺（acrylamide，簡稱Acr）和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺（bisacrylamide，簡稱Bis）在催化劑的作用下，通過自由基引發(fā)聚合反應，形成不帶電荷、且具有分子篩性質(zhì)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。其孔徑大小由聚合鏈的長度和交聯(lián)度所決定。 聚合鏈的長度與丙烯酰胺濃度有關，交聯(lián)度由Acr與Bis的相對比例決定，調(diào)節(jié)單體丙烯酰胺與交聯(lián)劑（Bis）的濃度比例，可形成具有不同交聯(lián)度的網(wǎng)狀聚合物。其中Bis的濃度越低，凝膠的孔徑越大，適用于分離較大的分子；Bis的濃度越高，網(wǎng)孔越小，分辨率越高，越有利于分離較小的分子。 【注意事項】 1. 本產(chǎn)品對人體有毒，操作時請?zhí)貏e小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。 2. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
蘇木素伊紅（HE）染色試劑盒
基本售價：380.00元
ECOTOP生產(chǎn)的蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒(Hematoxylin and Eosin Staining Kit)綜合了多種經(jīng)典的HE染色方法，例如Harris法、Mayer法等，簡化了操作步驟，縮短了操作時間，并且染色液內(nèi)不使用汞、甲醇等有毒試劑。可以用于組織切片或培養(yǎng)細胞的染色。蘇木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被稱作蘇木精染色，是最常用的組織和細胞的染色方法之一。無色的蘇木素(hematoxylin)氧化后形成有醌環(huán)結(jié)構(gòu)(quinoid ring)的氧化蘇木素(hematein or haematein)，從而可以和三價的鋁離子、鐵離子等形成有顏色的帶正電荷的復合物(如hematein-Al3+ complexes)。氧化蘇木素(也稱氧化蘇木精)和鋁離子等形成有色的復合物的過程也被稱為Dye Lake Formation。細胞核內(nèi)基因組DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，雙鏈上的磷酸基團向外，帶負電荷，呈酸性，很容易與帶正電荷的氧化蘇木素復合物結(jié)合，從而形成細胞核染色。蘇木素染色液有多種不同的配制方法，不同的方法可以把細胞核染色成不同深淺的藍色或藍紫色。伊紅(eosin)是一種化學合成的酸性染料，在水中解離成帶負電荷的陰離子，可以和蛋白質(zhì)氨基上帶正電荷的陽離子結(jié)合，從而使細胞胞漿染成不同程度的紅色或粉紅色，與蘇木素染色液染色形成的藍色細胞核形成鮮明對比，從而使蘇木素伊紅(HE)染色成為病理組織切片中最廣泛使用的一種常規(guī)染色方法。蘇木素伊紅染色后細胞核呈現(xiàn)藍色，細胞漿呈現(xiàn)粉紅色或紅色。
潮霉素B 50mg/ml(無菌）
基本售價：800.00元
Hygromycin B solution 50mg/ml 10ml【保存條件】4℃保存，一年有效【概述】潮霉素 B 是一種氨基糖苷類抗生素，可通過抑制蛋白質(zhì)合成來對抗細菌，真菌和高級真核生物。潮霉素 B最初是作為抗蠕蟲藥開發(fā)的，在研究實驗室中主要用于選擇和維持帶有潮霉素抗性基因的細胞?！静僮鞣椒ā?. 常用篩選濃度注意：潮霉素 B 用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為 50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。一般而言，哺乳動物細胞 50-500μg/mL；細菌/植物細胞 20-200μg/mL；真菌 300-1000μg/mL。2. 殺滅曲線的建立注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素最低濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇 5 個濃度。1）第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照 20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2 培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。2）根據(jù)細胞類型，設定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定 50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者 PBS buffer 按照 1:10 的比例將母液稀釋到 5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。3）第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。4）接下來每 3-4 天更換新的含藥物培養(yǎng)基。5）按照固定的周期（如每 2 天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是 7-10 天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的最低濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選1）轉(zhuǎn)染 48h 后，用含有適當濃度的潮霉素 B 篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷效果最好。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過 25%。2）每隔 3-4 天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。3）篩選 7 天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。4）挑取并轉(zhuǎn)移 5-10 個抗性克隆于 35mm 細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng) 7 天。5）之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可?！咀⒁馐马棥?. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 本品為有毒化合物，避免與皮膚和眼睛接觸，請小心操作。
5XSDS-PAGE雙色蛋白Loading buffer（DTT）
基本售價：150.00元
【保存條件】 建議分裝凍存，避免反復凍融，-20℃避光保存，有效期 1 年 【概述】 5×SDS-PAGE 雙色蛋白上樣緩沖液可保護蛋白質(zhì)在樣品制備步驟中免受熱降解，并在SDS-PAGE 運行期間防止 pH 值變化。一些蛋白質(zhì)對在 Tris 緩沖液中電泳期間溫度波動引起的 pH 變化敏感，優(yōu)化后的上樣緩沖液組分可防止在 SDS-PAGE 電泳之前的樣品加熱過程中以及電泳過程中蛋白質(zhì)降解。SDS 可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS 復合物上帶有大量的負電荷，這時蛋白質(zhì)本身的電荷完全被 SDS 掩蓋，消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異；SDS 還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵，破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu)。DTT 可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵，破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白（亞單位），電泳速度只是與其分子量大小有關。上樣緩沖液包含兩種跟蹤染料：藍色（溴酚藍），用于跟蹤電泳的進度；粉紅色（pyroninY），用于在 Western 印跡過程中監(jiān)測蛋白質(zhì)向膜的轉(zhuǎn)移。 【使用建議】 1. 室溫或 37℃水浴解凍 5×SDS-PAGE 雙色蛋白上樣緩沖液，并搖晃混勻。2. 請按每 40μl 蛋白樣品加入 10μl 上樣緩沖液的比例(5 倍稀釋)來使用。如果蛋白樣品濃度過高，可用雙蒸水稀釋。3. 混勻后，100℃水浴加熱 5-10 分鐘，使蛋白變性。4. 冷卻至室溫后，10000-14000rpm 離心 2-5 分鐘，取上清直接上樣電泳即可【注意事項】 1. DTT 對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。2. 該產(chǎn)品于-20℃保存時會出現(xiàn) SDS 沉淀，使用前請確保溶液完全復溶混勻，有必要時可置于 37℃水浴促溶。3. 蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍、吡羅紅指示劑，PH 值受保存溫度影響，在低溫凍存狀態(tài)下，溶液可能會呈現(xiàn)深棕色，不影響產(chǎn)品使用。4. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為 8%時溴酚藍指示條帶的位置大概在 30kd 左右， 膠濃度為 12%時，約在 20kd 左右，膠濃度為 15%時，大概在 10kd。請根據(jù)自己目標條帶來判斷結(jié)果電泳時間。5. 一般而言，吡羅紅的遷移速度快于溴酚藍。在較高百分比的 SDS 聚丙烯酰胺凝膠（例如15%）中，吡羅紅染料的遷移速度比溴酚藍慢。6. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒100T
基本售價：599.00元
Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit【保存條件】 -20℃保存一年【使用建議（僅供參考）】 1. 準備溶液：室溫融解試劑盒中的三種試劑，溶解后立即放置在冰上，混勻。取適當量的細胞漿蛋白抽提試劑 CE I/II 及細胞核蛋白抽提試劑 NE 備用，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入蛋白酶抑制劑混合物及 PMSF，使 PMSF 的最終濃度為 1mM（現(xiàn)配現(xiàn)用）。 A: 對于貼壁細胞：用 PBS 洗一遍，用細胞刮子刮下細胞，或用 EDTA 溶液處理細胞使細胞不再貼壁很緊，并用移液器吹打下細胞。離心收集細胞，盡最大努力吸盡上清，留下細胞沉淀備用。（注：盡量避免用胰酶消化細胞，以免胰酶降解需抽提的目的蛋白。） B: 對于懸浮細胞：用預冷的 PBS 清洗一遍，離心收集細胞，盡最大努力吸盡上清，留下細胞沉淀備用。2. 每 20 微升細胞沉淀加入 100 微升添加了 PMSF 和蛋白酶抑制劑的細胞漿蛋白抽提試劑CE I。（對于 200 萬 HeLa 細胞，其細胞沉淀的體積大約為 20 微升或 40 毫克。) 2. 每 20 微升細胞沉淀加入 100 微升添加了 PMSF 和蛋白酶抑制劑的細胞漿蛋白抽提試劑 CE I。（對于 200 萬 HeLa 細胞，其細胞沉淀的體積大約為 20 微升或 40 毫克。)3. 最高速劇烈渦旋 5-10 秒，把細胞沉淀完全懸浮并分散開。(如果細胞沉淀沒有完全懸浮并分散開，可以適當延長 vortex 時間。)4. 冰浴 10-15 分鐘。（過程中可適當渦旋 2-3 次）5. 4℃下 3000rpm 轉(zhuǎn)速下離心 5 分鐘。6. 收集上清液（上清為細胞質(zhì)提取物，儲存在-80℃或準備加入 Western Blot 實驗中。注意此時沉淀并不致密）7. 將步驟 6 中沉淀重懸于 100 微升細胞漿蛋白抽提試劑 CE II 中。8. 4℃下 3000rpm 轉(zhuǎn)速下離心 5 分鐘，除去上清液（剩余沉淀為細胞核）。若想更好的清洗細胞核，可重復步驟 7 和步驟 8 一次。9. 向此沉淀物中添加等體積的細胞核蛋白抽提試劑 NE（即，如果沉淀為 40 μL，則添加 40μL NE）10. 將沉淀重懸并在冰上孵育 10 分鐘（過程中可適當渦旋 3-5 次）。11. 在 4℃下以 14,000 rpm 離心 5 分鐘。12. 收獲上清液（這是核提取物）。13. 將提取物儲存在-80℃或準備加入 Western Blot 實驗中?！咀⒁馐马棥?. 盡量減少反復凍融的次數(shù)，以免效率下降。2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
BCA蛋白濃度測定試劑盒
基本售價：390.00元
BCA Protein Assay Kit 【保存條件】 BCA 試劑 A 室溫避光保存 1 年BCA 試劑 B 室溫保存 1 年蛋白標準品-20℃保存 1 年 【概述】 BCA蛋白濃度測定試劑盒(BCA Protein Assay Kit)是根據(jù)目前世界上最常用的兩種蛋白濃度檢測方法之一 BCA 法研制而成， 實現(xiàn)了蛋白濃度測定的簡單、高穩(wěn)定性、高靈敏度和高兼容性。靈敏度高，檢測濃度下限達到 25μg/ml，最小檢測蛋白量達到 0.5μg，待測樣品體積為 1-20μl。在 50-2000μg/ml 濃度范圍內(nèi)有較好的線性關系。BCA 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達 5%的 SDS，5%的Triton X-100，5%的 Tween20、60、80。但本試劑盒受螯合劑和略高濃度的還原劑的影響，需確保 EDTA低于 10mM，無 EGTA，二硫蘇糖醇(DTT) 低于 1mM，β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于 0.01%。不適用BCA 法時建議試用本司生產(chǎn)的 Bradford 蛋白濃度測定試劑盒。 【操作方法】 1.配制 BCA 工作液：依據(jù)樣品數(shù)量，將試劑 A 和試劑 B 按體積比 50:1 配制適量 BCA 工作液，并充分混勻。注：配制 BCA 工作液前請將試劑 A 搖晃混勻，觀察是否析出結(jié)晶，如若析出結(jié)晶，可 37℃水浴促溶。2.稀釋蛋白標準品：蛋白樣品在什么溶液中，標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見，如果蛋白樣品所在溶液不含有干擾本試劑盒檢測的物質(zhì)，也可以用 0.9%NaCl、PBS 或水稀釋標準品。蛋白標準液(5mg/ml BSA)如果凍存，請完全融化并混勻后使用。具體如下表：3.蛋白濃度的檢測a. 取 5μl 不同濃度蛋白標準加到 96 孔板的蛋白標準孔中。b. 取 5μl 樣品到 96 孔板的樣品孔中。如果樣品不足 5μl，需加標準品稀釋液補足到 5μl。請注意記錄樣品體積。c. 各孔加入 195μl BCA 工作液。 37℃放置 30 分鐘。注:也可以室溫放置 2 小時，或 60℃放置 30 分鐘。BCA 法測定蛋白濃度時，顏色會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫 度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或適當延長孵育時間。d. 用酶標儀測定 A595，或 560-610nm 之間的其它波長的吸光度。可以立即測定吸光度，也可以在 2小時內(nèi)測定，2 小時內(nèi)檢測數(shù)據(jù)無顯著變化。4.數(shù)據(jù)計算a.以不同濃度的蛋白標準液為橫坐標b. 以不同濃度的蛋白標準測得 OD 值（多孔則為平均 OD）為縱坐標c. 建立線性關系，獲得公式（如右圖中所示(本產(chǎn)品實際檢測)，若測得樣品 OD=0.6 則 0.6=0.4995x+0.4151，計算得濃度 x=0.37mg/ml）【注意事項】1. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。2. 不同 96 板的吸收值會有不同，得到 OD 有區(qū)別為正常現(xiàn)象（保證數(shù)據(jù)呈線性關系）。3. 蛋白標準液（5mg/ml）收到后盡快分裝，避免反復凍融。4. BCA 試劑 A 在低溫環(huán)境下會析出結(jié)晶，可適當 37℃水浴促溶后使用。5. 請使用 96 孔底部透明板（如普通細胞培養(yǎng)板）檢測，最佳波長為 595nm。
DNA凝膠試劑盒100T
基本售價：250.00元
從各種濃度的瓊脂糖凝膠中回收70bp-100Kbp DNA片段產(chǎn)品組成產(chǎn)品介紹本試劑盒采用可高效、專一結(jié)合 DNA 的硅基質(zhì)材料和獨特的緩沖液系統(tǒng)，可從各種濃度的 TAE 或TBE 瓊脂糖凝膠上回收 70bp-10kbp 大小的 DNA 片段，同時除去蛋白質(zhì)、其它有機化合物、無機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)，回收率可達 80%以上。每個離心吸附柱每次可吸附的 DNA 量為 20μg。使用本試劑盒回收的 DNA 可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、PCR、測序、文庫篩選、連接和轉(zhuǎn)化等實驗。存儲條件該試劑盒置于室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存 12 個月，更長時間的保存可置于 2-8℃。2-8℃保存條件下，Buffer QG 可能產(chǎn)生沉淀，使用前可在 55℃水浴中預熱 10 min 以溶解。需要額外準備的材料□ 無水乙醇（96%-100%）□ 無菌 1.5ml 離心管開始前注意事項 請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項?！?電泳時最好使用新的電泳緩沖液，以免影響電泳和回收效果?！?如下一步實驗要求較高，核酸電泳時則應盡量使用 TAE 電泳緩沖液?！?切膠時，紫外照射時間應盡量短，以免對 DNA 造成損傷。□ 如果回收率較低，可在膠充分溶解后檢測 pH 值，如 pH 值大于 7.5，可向含有 DNA 的膠溶液中加10-30μl 3M 醋酸鈉（pH5.2）將 pH 值調(diào)到 5-7 之間?！?回收<70bp 或>10kb 的 DNA 片段時，應加大 Buffer QG 的體積，延長吸附和洗脫時間?！?回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關，初始量越少、洗脫體積越少，回收率越低?！?高溫及潮濕等不利環(huán)境因素對吸附柱產(chǎn)生影響，請將吸附柱儲存于陰涼干燥的環(huán)境中。開始前試劑準備□ 按瓶子標簽所示，加入 4 倍體積的無水乙醇稀釋 Buffer PW，于室溫密封保存?！?確認 Buffer QG 溶液顯示為黃色。DNA 濃度及純度檢測? 回收得到的 DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。? DNA 應在 OD260 處有顯著吸收峰，OD260 值為 1 相當于大約 50μg/ml 雙鏈 DNA、40μg/ml 單鏈DNA。? OD260/OD280 比值應為 1.7-2.0，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用 ddH2O 比值會偏低，因為pH 值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。操作步驟：1. 配制所需濃度的瓊脂糖凝膠，電泳分離 DNA 片段。當 DNA 片段分離后，將凝膠置于紫外燈下，用干凈鋒利的手術刀快速切下含目的片段大小的 DNA 凝膠。為避免 DNA 片段受到損傷，應盡量減少凝膠的紫外照射時間，切膠時應盡量切去多余凝膠。2. 放入 1.5ml 離心管中并稱取凝膠塊的重量，加入 3 倍體積的 Buffer QG（如凝膠稱重結(jié)果為 100mg，則其體積約等于100μl，應加入 300μl Buffer QG）。對于>2%的瓊脂糖凝膠，添加 6 倍體積的 Buffer QG。3. 50℃水浴 10min（或直至凝膠完全溶解即可），水浴期間可顛倒混勻加速溶膠。注意：若回收<300bp 的 DNA 片段可在完全溶膠后加入一倍凝膠體積的異丙醇以提高回收率；膠塊完全溶解后最好將溶液溫度降至室溫再上柱，因為吸附柱在室溫時結(jié)合 DNA 能力較強。4. 凝膠完全溶解后，檢查顏色是否為黃色（類似于沒有溶解瓊脂糖的 Buffer QG）。如果混合物的顏色為橙色或紫色，則加入 10μl 3 M 醋酸鈉(pH 5.0)并混合，混合物的顏色會變成黃色。DNA 吸附到膜上僅在 pH ≤ 7.5 時有效。Buffer QG 含有一種 pH 指示劑，在 pH ≤7.5 時為黃色，在較高 pH 時為橙色或紫色，可通過顏色輕松確定 DNA 結(jié)合的最佳 pH。5.（選做）向上述溶膠液中加入 1 倍凝膠體積的異丙醇并混合。例如，如果瓊脂糖凝膠切片為 100mg，則添加 100μl 異丙醇。此步驟增加了≤500bp 和≥4 kb 的 DNA片段的產(chǎn)量。對于 500bp-4kb 之間的 DNA 片段，添加異丙醇對產(chǎn)量沒有影響。6. 將吸附柱套在 2ml 收集管中，并將上一步得到的溶液加入到吸附柱中，≥8000×g(≥10,000 rpm)離心 30s，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。吸附柱最大容量為 700μl，若樣品體積大于 700μl，可分批加入；為提高回收率，可短暫離心用于溶膠的 1.5ml 離心管后再將溶液轉(zhuǎn)移如吸附柱。7. 向吸附柱中加入 500μl Buffer PW（已加入無水乙醇），≥8000×g(≥10,000 rpm)離心 30s，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。注意：如果回收的 DNA 是用于鹽敏感的實驗，例如平末端連接實驗或直接測序，建議加入 Buffer PW后靜置 2-5min 后再離心。8. 重復操作步驟 7 一次9. 倒掉收集管中的廢液后將吸附柱再次套入收集管中，最大轉(zhuǎn)速 (~13,400×g)離心 2min 以干燥吸附柱膜，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。將吸附柱套入新的1.5ml 離心管中并于室溫開蓋放置 5-10min 徹底晾干。注意：Buffer PW 中的乙醇殘留會影響后續(xù)的酶反應（酶切、PCR 等）實驗。10. 向吸附柱膜中央位置懸空滴加 30-50μl Buffer EB，蓋上蓋子室溫靜置 2min 后，最大轉(zhuǎn)速 (~13,400×g)離心 2min 收集 DNA 溶液并置于-20℃保存。注意：洗脫體積不應小于 30μl，體積過少影響回收效率。洗脫液的 pH 值對于洗脫效率有很大影響。若后續(xù)做測序，需使用 ddH2O 做洗脫液，并保證其 pH 值在 7.0-8.5 范圍內(nèi)，pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率。為了提高 DNA 的回收量，可重復操作步驟 10 一次。常見問題：1.回收效率低? 凝膠未充分溶解:溶膠時，50~55℃水浴 10min，其間顛倒混勻數(shù)次，讓凝膠充分溶解。? 凝膠用量過多:過量的凝膠會降低回收率，切膠時盡量去除多余的凝膠。? 溶膠液不足：3 倍體積的 Buffer QG 是為了保證在各種濃度的瓊脂糖凝膠中都能有較好的回收率，盡量不要節(jié)省。? 洗脫不充分：建議用 Buffer EB 洗脫兩次，以獲得最高的回收率，洗脫液必須加入柱子的膜中央。? 試劑準備有誤：Buffer PW 沒有加入乙醇稀釋或體積不準確(乙醇濃度需控制在 80%)。2. 回收后出現(xiàn)雜帶? DNA 變性：有些 DNA 片段對溫度比較敏感，雜帶有可能是單鏈的 DNA。降低溶膠溫度至 37~50℃。降低溫度，可延長溶膠時間至 20~40min 讓凝膠充分溶解。3. 鹽污染? A260/230 太低：Buffer QG 溶液中的異硫氰酸胍在 A230 中有較高的吸收峰。使用該產(chǎn)品，A260/230 通常小于 1.0。實驗表明，該產(chǎn)品得到的 DNA 不會影響下游的運用，包括測序，連接，定量 PCR，PCR，酶切等。4. 連接不理想? 乙醇污染：洗脫 DNA 前，打開柱子的蓋子，空氣干燥 10~15min 以徹底去除乙醇。? 核酸變性：降低溶膠溫度至 37~50℃。降低溫度，可延長溶膠時間至 20~40min 讓凝膠充分溶解。降低溫度能有效減少核酸的脫嘌呤和變性的影響。
動物血液基因組小量提取試劑盒50T
基本售價：398.00元
從10-250ul血液及相關體液等樣品中直接提取總DNA產(chǎn)品介紹 本試劑盒適用于哺乳動物血液核酸提取，不含苯酚等有毒化學試劑組分，采用獨特的緩沖液配方 BufferIRB 最大限度去除血液抑制劑的影響，同時應用先進的硅膠膜吸附技術，操作簡單、快速。得到的 DNA比傳統(tǒng)試劑盒純度更高，可直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、測序及 PCR 等分子生物學實驗。 存儲條件 本產(chǎn)品除 Proteinase K 溶液和 RNase 溶液外，可在室溫(15~25℃)保存 12 個月。低溫下 Buffer BL 或Buffer IRB 可能會有沉淀形成，使用時需 55℃水浴讓沉淀完全溶解。Proteinase K 溶液和 RNase A 溶液冰袋運輸，收到產(chǎn)品后請分裝保存于-20℃。 需要額外準備的材料 □ 無水乙醇（96%-100%）□ 無菌 1.5/2ml 離心管開始前注意事項 請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項。● Buffer BL 和 Buffer IRB 是如有混濁現(xiàn)象，可在 55℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復澄清?！?基因組提取所有步驟都在室溫（15-25°C）下進行。 開始前試劑準備 □ 按瓶子標簽所示，Buffer BL 及 Buffer IRB 中加入適量的無水乙醇稀釋，于室溫密封保存。 DNA 濃度及純度檢測 ? 回收得到的 DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測純度與濃度。? DNA 應在 OD260 處有顯著吸收峰，OD260 值為 1 相當于大約 50μg/ml 雙鏈 DNA、40μg/ml 單鏈DNA。 ? OD260/OD280 比值應為 1.7-2.0，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用 ddH2O，比值會略低，因為 pH 值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。 應用領域 該方案適合于從約 10μl-1ml 人類的抗凝血液、血清、血漿、尿液、或其它體液樣品中直接提取總 DNA。該方案直接對樣品進行裂解消化，獲得的 DNA 包括了基因組 DNA(如淋巴細胞、線粒體 DNA、游離的DNA(>100bp)、以及病毒 DNA(如乙肝)等；
青鏈霉素混合液（100×）雙抗
基本售價：150.00元
【保存條件】-20℃保存一年 【概述】細胞培養(yǎng)基中有時加入適量濃度的抗生素，可以有效防止微生物的污染。本品青霉素的含量為 10kU/ml，鏈霉素的含量為 10mg/ml。該溶液用 0.9%氯化鈉配制，經(jīng) 0.22μm 濾膜過濾除菌，使用時按照 100 倍稀釋使用即可。 【使用建議（僅供參考）】1. 在無菌的細胞培養(yǎng)液中直接添加：按照每 500ml 細胞培養(yǎng)液添加 5ml 的比例加入青鏈霉素混合液(100×)，混勻即可使用。2. 配制細胞培養(yǎng)液時加入，然后再過濾除菌：配制細胞培養(yǎng)液時按照每配制 1L 細胞培養(yǎng)液加入 10ml 的比例加入青鏈霉素混合液(100×)，配制完成后過濾除菌即可使用。 【注意事項】1. 盡量減少反復凍融的次數(shù)。2. 注意無菌操作，盡量避免污染。3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
Superstar飛克超敏ECL化學發(fā)光試劑盒
基本售價：500.00元
ECL Western Blotting Substrate 【保存條件】 4℃避光保存 12 月 【概述】 超敏發(fā)光液用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶 HRP 的抗體及其關聯(lián)的抗原。 用于 HRP 標記抗體的 Western Blot 和 HRP 標記探針的核酸雜交。由于采用了獨特的發(fā)光底物 系統(tǒng)，SuperStar ECL 超敏發(fā)光液是目前最靈敏的商業(yè)化熒光 ECL 檢測試劑（具有極高靈 敏度和高信噪比）；可在日光燈下進行發(fā)光操作；發(fā)光迅速，熒光可使 X 光膠片感光達 12 小時以上，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測；可使用更高的抗體稀釋倍數(shù)(1:2000～1:10000)， 極其節(jié)省抗體。 【特點】 ? 飛克級靈敏度 - 在硝酸纖維素或 PVDF 膜上檢測低至飛克量的目標蛋白量 ? 高信號穩(wěn)定性 - 孵育印跡在關鍵的 4 小時時間內(nèi)提供穩(wěn)定的信號持續(xù)時間，在最佳條 件下可產(chǎn)生長達 24 小時的光輸出 ? 穩(wěn)定的試劑 - 8 小時工作溶液穩(wěn)定性; 在 4℃下 1 年的試劑盒穩(wěn)定性 ? 更經(jīng)濟的抗體用量： 0.2 至 1.0μg/ mL 一抗（從 1 mg / mL 原液中 1：1000 至 1：5000 稀釋） 10 至 50 ng / mL 二級抗體（從 1 mg / mL 原液中 1：20,000 至 1：100,000 稀釋） 【操作方法】 1. 執(zhí)行常規(guī) SDS-PAGE、轉(zhuǎn)膜和 Western Blot 步驟。注意用 HRP 標記 lgG 或用一抗-鏈 親和素-生物素-HRP 夾法。2. Western Blot 最后一次洗膜的同時新鮮配制發(fā)光工作液：分別取 A:B=1:1 混合（如需要 1ml 發(fā)光液則取 500ul ECL A 液和 500ul ECL B 液混合），放入干凈容器中混合。建議立即使用 工作液，室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有降低。 3. 用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入發(fā)光工作液 (0.125ml 發(fā)光工作液/cm2 膜)中，與發(fā)光工作液充分接觸。室溫孵育 2 分鐘，準備立即壓片 曝光。孵育時間過長不會增加靈敏度，有時還會導致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促 反應，使用過少的發(fā)光工作液不利反應進行，也會導致膜上條帶曝光不均和明顯降低靈敏度。 為達節(jié)約目的可將 膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。 4. 用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。 5. 打開 X 光膠片暗盒，在暗盒內(nèi)表面鋪一張面積大于膜的保鮮膜。將 Western Blot 膜貼在 保鮮膜上，將保鮮膜折起來完全包裹 Western Blot 膜，去除氣泡和皺褶，可剪去邊緣部多余 的保鮮膜。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。用膠帶將覆蓋 Western Blot 膜的保鮮膜固定在暗 盒內(nèi)，蛋白帶面向上。 6. 暗房內(nèi)壓 X 光膠片，分別曝光不同的時間如數(shù)秒到數(shù)分鐘。顯影沖洗。 【注意事項】 1. 步驟 1～5 可在日光燈下操作;但發(fā)光液曝露于強光下時間過久靈敏度可能略有降低，移 到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。2. 長時間曝光或蛋白過量，將加深背景并使條帶強弱變化失去線性關系。曝光不足則條帶 模糊。3. 發(fā)光工作液孵育約 2 分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見，低豐度蛋 白條帶 發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可使 X 光膠片曝光。不能簡單以肉眼觀察判斷條帶發(fā) 光時間。肉眼不可見的熒光實際上可持續(xù)數(shù)小時并使 X 光膠片感光，因而弱帶可曝光 1-10 小 時。如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用 ECL 發(fā)光和 曝光。4. 由于超敏發(fā)光液極其靈敏，強烈推薦大多數(shù)進口抗體起始濃度為一抗 1:1000～1:4000， 二抗 1:2000～1:5000?？贵w濃度過高將造成高背景或沒有條帶，導致失敗。5. 某些保鮮膜包裹印跡膜時可能會淬滅熒光，應選擇高質(zhì)量保鮮膜。 6. 使用肉眼可見的預染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標簽可精確確定膠片上條帶 的位置和大小。7. NaN3能抑制 HRP 活性，回收第二抗體應避免使用 NaN3，如必需使用勿超過 0.01%。
GO3000 HiTrans轉(zhuǎn)染試劑1ml
基本售價：350.00元
GO3000 HiTrans Reagent【保存條件】-20oC 保存 2 年【概述】1. Ecotop 品牌高效轉(zhuǎn)染試劑（GO3000 HiTrans Reagent），適用于真核哺乳動物細胞轉(zhuǎn)染，有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高等特點。2. 適用于：293T/293A/HEK293/CHO/Hela 等哺乳動物細胞，轉(zhuǎn)染效率可高達 90%以上。通常 293 細胞轉(zhuǎn)染效率可以高達 90%以上。大多數(shù)常見的細胞例如 Hela 細胞、CHO 細胞等也都適合用該試劑轉(zhuǎn)染，但效率比 293 細胞要略低一些。3. 應用：細胞瞬時轉(zhuǎn)染、慢病毒包裝、腺病毒包裝、AAV 病毒包裝、逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝4. 本試劑經(jīng)過 0.22μm 過濾器除菌處理，可直接使用。【操作方法】1. 對于貼壁細胞（以下均以 6 孔板為例，其它培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板請根據(jù)相應面積換算）：a. 將細胞培養(yǎng)于培養(yǎng)皿或培養(yǎng)板內(nèi)，通常在鋪板后 1-2 天內(nèi)長到 70-90%。b. 在轉(zhuǎn)染前 1-2 小時，吸去細胞培養(yǎng)液，更換為新鮮的不含抗生素的完全培養(yǎng)液 2ml。c. 取 2-4μg 待轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒 DNA (質(zhì)?？傮w積不宜超過 20μl，若有多種質(zhì)粒請混勻)，以質(zhì)量體積比 1：3 加入轉(zhuǎn)染試劑 6~12μl（如 2μg 待轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒 DNA 加入轉(zhuǎn)染試劑 6μl）。d. 混勻后，室溫孵育 3-5 分鐘。e. 把 DNA-轉(zhuǎn)染試劑混合物中加入 500μl opti-MEM（若無 opti-MEM 可使用無血清無雙抗的 DMEM 或 1640，具體根據(jù)轉(zhuǎn)染細胞使用的培養(yǎng)基）,充分混勻后靜置 10-15 分鐘。f. 后均勻滴加到整個 6 孔板內(nèi)（加入前吸出原培養(yǎng)板中 500μl 培養(yǎng)基），并置于含 5%二氧化碳的 37oC 細胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。g. 在轉(zhuǎn)染后 4-6 小時左右換液，更換為 2ml 新鮮的完全培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。h. 通常在轉(zhuǎn)染約 24-48 小時后就可以檢測到轉(zhuǎn)染基因的表達。2. 對于懸浮細胞：www.ecotopbio.coma. 離心收集懸浮細胞，用 PBS 洗滌一次。b. 按照上面的步驟 c)、d)、e）制備 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM 混合物。c. 每 106 個細胞的沉淀，用 500 微升 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM 混合物重新懸浮，室溫放置 15-20 分鐘。d. 在一個 6 孔板孔內(nèi)加入 1.5ml 完全培養(yǎng)液，然后加入來自上一步的細胞-500 微升 DNA-轉(zhuǎn)染試劑-optiMEM混合物，混勻。e. 在含 5%二氧化碳的 37oC 細胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。f. 根據(jù)實驗要求和轉(zhuǎn)染試劑對于不同細胞的毒性不同，在 4-6 小時后離心收集細胞，用 PBS 洗一次，然后用 2 毫升完全培養(yǎng) 液重新懸浮細胞，繼續(xù)培養(yǎng)。g. 通常在轉(zhuǎn)染約 24-48 小時后就可以檢測到轉(zhuǎn)染基因的表達。
0.25%胰酶溶液（含EDTA，含酚紅）100ml
基本售價：100.00元
冰袋運輸 Trypsin-EDTA (0.25%)這種液體胰蛋白酶配方內(nèi)含 EDTA 和酚紅。ECOTOP 胰蛋白酶-EDTA 由胰蛋白酶粉（來自豬胰腺的蛋白酶輻照混合物）制成。鑒于其消化強度，胰蛋白酶被廣泛用于細胞解離、常規(guī)細胞培養(yǎng)傳代以及初生組織解離。解離所需的胰蛋白酶濃度因細胞類型和實驗要求而異。 【保存條件】4℃保存，一年有效。短期內(nèi)不使用，可-20℃保存延長有效期。 【概述】0.25%胰酶細胞消化液(含 EDTA)含 0.25%胰酶、EDTA 和酚紅，pH 值為 7.2-7.8。該消化液經(jīng)過過濾除菌，可以直接用于培養(yǎng)細胞的消化，或者一些組織的消化。 【使用建議（僅供參考）】1. 貼壁細胞的消化：a.吸去培養(yǎng)液，用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次，以去除殘余的血清。b.加入少量 0.25%胰酶細胞消化液(含 EDTA)，略蓋過細胞即可，室溫放置 30 秒至 2 分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。c.顯微鏡下觀察，細胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化；或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來。此時吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的完全細胞培養(yǎng)液，吹打下細胞，即可直接用于后續(xù)實驗。d.如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入胰酶細胞消化液重新消化。如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長，未及吹打細胞，細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落，直接用胰酶細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 分鐘，沉淀細胞，盡量去除胰酶細胞消化液后，加入含血清的完全培養(yǎng)液重新懸浮細胞，即可用于后續(xù)實驗。 2. 組織的消化：a.不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。 【注意事項】1. 胰酶消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差。2. 注意無菌操作，盡量避免污染。3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
雙抗Plus-支原體抗生素復合物（100×）
基本售價：350.00元
Mycoplasma Antibiotics Mixture (100×) 【特別提醒】 1. 凍-20會有沉淀為正常現(xiàn)象，常溫溶解后輕搖瓶子會溶解，不影響使用效果2. 干細胞、神經(jīng)細胞、原代細胞等較為敏感細胞使用上要謹慎使用3. 常規(guī)細胞（尤其污染較嚴重的）在早期使用時會有部分細胞死亡為正常現(xiàn)象，培養(yǎng)3-5天后即正常，背景（40-100倍鏡下）相對更為干凈4. 可長期代替雙抗使用，若早期培養(yǎng)后細胞干凈了（使用1-2周后），可減半使用【保存條件】 -20℃保存兩年有效；4℃保存一年有效 【概述】 細胞培養(yǎng)基中有時加入適量濃度的抗生素，可以有效防止微生物的污染。本品含有抗支 原體藥物，在細胞培養(yǎng)中不需額外添加青霉素-鏈霉素雙抗，使用時按照 100 倍稀釋使用即 可。 【使用建議（僅供參考）】 1. 在無菌的細胞培養(yǎng)液中直接添加：按照每 500ml 細胞培養(yǎng)液添加 5ml 的比例加入雙抗 Plus(100×)，混勻即可使用。 2. 配制非無菌細胞培養(yǎng)液時加入，然后再過濾除菌：配制細胞培養(yǎng)液時按照每配制 1L 細胞 培養(yǎng)液加入 10ml 的比例加入雙抗 Plus(100×)，配制完成后過濾除菌即可使用。 【注意事項】 1. -20℃保存時易產(chǎn)生沉淀，室溫或 37℃加熱復溶搖勻即可。 2. 盡量避免反復凍融，建議分裝使用。 3. 注意無菌操作，盡量避免污染。 4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 5. 僅用于實驗室，不適合農(nóng)業(yè)/家庭/臨床用途使用。
1×PBS 緩沖液（無菌）（pH7.2-7.4）500ml
基本售價：60.00元
1×PBS緩沖液（無菌）使用說明書 【包裝規(guī)格】 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝 ES-8006 1×PBS buffer(pH7.2-7.4) (Sterile，without Ca2+，Mg2+) 500ml 使用說明書 1份 【保存條件】 室溫保存，有效期1年 【概述】 PBS（phosphate buffered solution）即磷酸鹽緩沖液，能夠提供相對穩(wěn)定的離子環(huán)境和pH緩沖能力，是生物學中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液,用于分子克隆及細胞培養(yǎng)等，pH為7.2-7.4，與人體血液等滲，主要成分為磷酸二氫鉀、氯化鉀、磷酸氫二鈉以及氯化鈉. 本產(chǎn)品為1×工作液，經(jīng)過除菌處理，可直接使用。 4℃保存可延長產(chǎn)品保質(zhì)期，長期不用建議低溫保存。 【注意事項】 1. PBS溶液在低溫情況下可能會產(chǎn)生沉淀。如果發(fā)現(xiàn)有沉淀產(chǎn)生，請置于37℃水浴至完全溶解后再使用。 2. PBS溶液在使用過程中應該避免微生物污染。 3. 為了您的安全與健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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