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NCM/新賽美
NCM/新賽美是一個(gè)非常優(yōu)質(zhì)的國(guó)產(chǎn)品牌
NCM/新賽美 快速重組無(wú)縫克隆試劑盒
基本售價(jià)：249.00元
產(chǎn)品介紹 EasyFusion Assembly Master Mix 是一種快速、簡(jiǎn)單且高效的定向同源重組克隆試劑盒，可將目的片段一個(gè)或多個(gè) （PCR 產(chǎn)物）定向克隆到任意載體的任意位置。該技術(shù)不依賴(lài)于 T4 連接酶、不受載體和目的片段的酶切位點(diǎn)限制， 僅需 15-30 分鐘實(shí)現(xiàn)高效無(wú)縫連接。 操作步驟 1.線(xiàn)性化載體準(zhǔn)備 可以通過(guò)以下兩種方法獲得線(xiàn)性化載體，最終載體的濃度需>10 ng/μl。(高濃度的載體有利于提高效率)。 （1）選擇合適的酶切位點(diǎn)線(xiàn)性化載體。（單酶切或雙酶切均可， 5′端突出、3′端突出或平末端均適用） （2）以載體為模板，設(shè)計(jì)引物，通過(guò) PCR 的方式擴(kuò)增出需要的線(xiàn)性化載體 2.擴(kuò)增插入片段引物設(shè)計(jì) 通常通過(guò) PCR 獲得目的片段，引物設(shè)計(jì)要保證目的片段兩端有至少 15bp-20bp 序列與線(xiàn)性化載體的兩端一致的 同源序列。PCR 每條引物長(zhǎng)度至少在 35-40bp 之間，包括 5′ 端和 3′端與線(xiàn)性載體同源的 15bp-20bp（不包括酶 切位點(diǎn)）以及目的片段特異性序列 20-25bp。 （1）單個(gè)片段的引物設(shè)計(jì)： 引物包含目的基因特異性序列和重疊序列 插入片段正向擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)方式為： 5′-上游載體末端 15-20bp 同源序列+目的基因特異性正向擴(kuò)增引物序列(20-25bp)-3′ 插入片段反向擴(kuò)增引物設(shè)計(jì)方式為： 5′-下游載體末端 15-20bp 同源序列+目的基因特異性正向擴(kuò)增引物序列(20-25bp)-3′ 設(shè)計(jì)引物時(shí)，可以參考以下實(shí)例（以 pUC19 線(xiàn)性化載體為例）： 3.PCR 擴(kuò)增插入片段 推薦使用高保真聚合酶進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增插入片段，以減少擴(kuò)增突變的產(chǎn)生，選擇聚合酶時(shí)無(wú)需考慮末端有無(wú) A 加尾 發(fā)生（重組過(guò)程中將會(huì)被去除，在最終載體中不會(huì)出現(xiàn)）。PCR 擴(kuò)增結(jié)束后，對(duì)目的 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行純化：若是擴(kuò)增模 板與克隆載體抗性不同，且 PCR 產(chǎn)物條帶電泳單一，產(chǎn)物可以無(wú)需純化直接用于重組反應(yīng)，或者對(duì) PCR 產(chǎn)物進(jìn)行脫鹽 等簡(jiǎn)單純化；否則，需要進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳回收特異性的目的 PCR 片段。 4.重組反應(yīng)進(jìn)行 取出 EasyFusion Assembly Master mix, 置于冰浴中，配制下圖應(yīng)體系（如果不慎將液體粘在管壁，可通過(guò)短暫離心沉降） 注意：10 ul 反應(yīng)體系中，載體和各插入片段建議量在 20-50ng 之間，載體與各插入片段的最佳摩爾比為 1:2-1:3 輕輕混勻反應(yīng)體系，50℃反應(yīng) 15-30 分鐘（對(duì)于多片段重組或大片段重組，建議反應(yīng)時(shí)間 30 分鐘，可延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí) 間至 1 小時(shí)）；待反應(yīng)結(jié)束后，將離心管置于冰上冷卻數(shù)秒，之后將重組產(chǎn)物保存于-20℃或用于轉(zhuǎn)化。 5. 反應(yīng)產(chǎn)物轉(zhuǎn)化、涂板及克隆鑒定 建議所使用的感受態(tài)細(xì)胞效率要達(dá)到> 5X 107 cfu/ug。轉(zhuǎn)化步驟按照不同菌種的要求進(jìn)行或者按標(biāo)準(zhǔn)轉(zhuǎn)化操作 進(jìn)行即可。菌落長(zhǎng)出之后，建議采用菌落 PCR 進(jìn)行陽(yáng)性克隆鑒定，或者對(duì)樣品進(jìn)行測(cè)序確保正確。 保存條件及組成成分 -20℃保存及冰袋運(yùn)輸 組成成分：2X EasyFusion Assembly Master Mix , 125ul; Linearized pUC19 Vector (10ng/ul),5ul;Control Insert（0.5kb, 20ng/ul),5ul 注意事項(xiàng) 1. 線(xiàn)性化載體或目的片段的純化的品質(zhì)及濃度等較差會(huì)顯著降低克隆陽(yáng)性率及克隆數(shù)。 2. 重組質(zhì)粒大小的增加（>12kb），克隆效率會(huì)顯著降低，選擇穩(wěn)定性更好的感受態(tài)及轉(zhuǎn)化效率更高效的感受態(tài)細(xì)胞。 3. 菌落較少時(shí)，建議適當(dāng)增加重組反應(yīng)產(chǎn)物的體積量，或者提高轉(zhuǎn)化產(chǎn)物量等。 4. 隨著重組片段數(shù)目的增加，克隆效率降低，建議增加引物重疊序列長(zhǎng)度或適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間。
NCM/新賽美 細(xì)胞/組織總RNA快速提取試劑盒
基本售價(jià)：499.00元
產(chǎn)品介紹 本試劑盒可以快速?gòu)募?xì)胞、細(xì)菌和動(dòng)物組織中提取總RNA。本產(chǎn)品中裂解液(RLT Lysis Bufer)可以快速裂解細(xì)胞和滅活RNA酶，通過(guò)DNA清除/RNA吸附通用柱吸附技術(shù)，去除基因組DNA殘留，同時(shí)在乙醇輔助結(jié)合條件下，高效地結(jié)合在吸附柱的硅膠膜上，再經(jīng)過(guò)多次的洗滌離心后，去除細(xì)胞代謝物和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，獲得純凈的總RNA。純化的RNA可用于RT-PCR，NorthernBlotPoly(A)+篩選等多種實(shí)驗(yàn)。 產(chǎn)品亮點(diǎn) 安全性高:無(wú)需使用苯酚，氯仿等試劑，無(wú)需乙醇沉淀 使用范圍廣:對(duì)細(xì)胞、細(xì)菌、動(dòng)物組織提取均適用 操作簡(jiǎn)單快速:全程室溫操作，10-20分鐘可完成純化步驟 提取純度高:經(jīng)多次柱吸附和洗滌，基因組DNA和蛋白質(zhì)污染低 首次使用前，在漂洗液 RWB Wash Buffer 中加入標(biāo)簽指定量的無(wú)水乙醇（5 preps/50 preps分別加入 4.8 ml/48 ml 無(wú)水乙醇），充分混勻后使用，并做好標(biāo)記。 *注意觀察各溶液是否有析出或渾濁（尤其冬季低溫環(huán)境時(shí)），可 37℃溫浴復(fù)溶至溶液澄清，避免影響使用效果。 運(yùn)輸和保存方式 常溫運(yùn)輸，室溫避光保存，有效期 12 個(gè)月。2-4°C 可保存更長(zhǎng)時(shí)間
NCM/新賽美 總RNA提取試劑
基本售價(jià)：399.00元
產(chǎn)品介紹 TRnaZol Reagent 適用于快速、直接從多種組織和細(xì)胞中提取總 RNA 的一種廣譜型試劑。TRnaZol Reagent 內(nèi)含優(yōu)化的異硫氰酸胍、酸性酚等物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞，抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶，最大 限度地裂解樣品且同時(shí)保證 RNA 的完整性。加入 RNA Extraction Buffer 離心后，溶液會(huì)分成三層：上 層無(wú)色水相、中間層和下層紅色有機(jī)相，其中 RNA 分布在上清無(wú)色水相中。本試劑操作快速方便，顏 色分明，提取的總 RNA 完整性好，純度高，無(wú)蛋白和 DNA 的污染，可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，如 RT-PCR、Real-time PCR、Dot Blot、Northern 等。 產(chǎn)品特色 ? 安全性高：使用 RNA Extraction Buffer 替代氯仿 ? 使用范圍廣：對(duì)人、動(dòng)物、植物和細(xì)菌組織提取均適用 ? 顏色分明：溶液呈粉紅色，便于分離水相和有機(jī)相 ? 提取純度高：DNA 和蛋白質(zhì)污染最低，可用于多種下游實(shí)驗(yàn) 產(chǎn)品介紹 TRnaZol Reagent 適用于快速、直接從多種組織和細(xì)胞中提取總 RNA 的一種廣譜型試劑。TRnaZol Reagent 內(nèi)含優(yōu)化的異硫氰酸胍、酸性酚等物質(zhì)，能迅速破碎細(xì)胞，抑制細(xì)胞釋放出的核酸酶，最大 限度地裂解樣品且同時(shí)保證 RNA 的完整性。加入 RNA Extraction Buffer 離心后，溶液會(huì)分成三層：上 層無(wú)色水相、中間層和下層紅色有機(jī)相，其中 RNA 分布在上清無(wú)色水相中。本試劑操作快速方便，顏 色分明，提取的總 RNA 完整性好，純度高，無(wú)蛋白和 DNA 的污染，可用于各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，如 RT-PCR、Real-time PCR、Dot Blot、Northern 等。 產(chǎn)品特色 ? 安全性高：使用 RNA Extraction Buffer 替代氯仿 ? 使用范圍廣：對(duì)人、動(dòng)物、植物和細(xì)菌組織提取均適用 ? 顏色分明：溶液呈粉紅色，便于分離水相和有機(jī)相 ? 提取純度高：DNA 和蛋白質(zhì)污染最低，可用于多種下游實(shí)驗(yàn) 組成成分及保存條件
NCM/新賽美 蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液-500ml
基本售價(jià)：399.00元
產(chǎn)品介紹 NCM Western Blot Stripping Buffer（蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液）是新賽美生物生產(chǎn)的用于去除結(jié)合在印跡膜（PVDF膜或NC膜）上的一抗和二抗的洗滌液。該產(chǎn)品作用溫和，不含有毒有味的巰基乙醇，在不影響目的蛋白的情況下，可使同一張印跡膜進(jìn)行多次抗體檢測(cè)。省去反復(fù)電泳和轉(zhuǎn)膜等步驟，節(jié)省樣品及時(shí)間，加快Western Blot檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。 產(chǎn)品特色 ? 獨(dú)有的配方，去除抗體效力強(qiáng) ? 對(duì)蛋白作用溫和，不影響目的蛋白 ? 不含有巰基乙醇，無(wú)毒無(wú)味，室溫條件下使用保存 ? 適用PVDF膜和NC膜，加速抗體檢測(cè) 操作步驟 1. 將曝光結(jié)束的蛋白印跡膜充分浸入適當(dāng)體積的NCM Western BlotStripping Buffer（蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液）中，抗體剝離液要充分覆蓋膜的表面，在脫色搖床上，室溫中速震蕩孵育10分鐘，棄去剝離液。 2. （可選）重復(fù)步驟1。（對(duì)于信號(hào)正?；蜉^弱的印跡膜也可以不必重復(fù)步驟1，如果是內(nèi)參等表達(dá)量高的蛋白，可以重復(fù)步驟1三次，以保證徹底去除了抗體。） 3. 每用鑷子取出印跡膜，加入洗滌緩沖液TBST或PBST，在脫色搖床上中速震蕩洗滌3次，每次5分鐘。 4. (可選)通過(guò)顯色曝光等方法檢測(cè)抗體是否去除，如檢測(cè)到信號(hào)，需重復(fù)步驟1，確?？贵w被除盡。 5. 對(duì)印跡膜重新進(jìn)行封閉，進(jìn)入下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)。 保存條件 室溫保存，運(yùn)輸，一年有效 注意事項(xiàng) 1. 建議先檢查表達(dá)量低的蛋白，再用NCM Western Blot Stripping Buffer處理印跡膜后，檢測(cè)表達(dá)量高的蛋白； 2. 本品適用于NC膜和PVDF膜，推薦使用PVDF膜，效果更佳； 3. 為了安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，戴手套操作
NCM/新賽美 蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液-200ml
基本售價(jià)：199.00元
產(chǎn)品介紹 NCM Western Blot Stripping Buffer（蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液）是新賽美生物生產(chǎn)的用于去除結(jié)合在印跡膜（PVDF膜或NC膜）上的一抗和二抗的洗滌液。該產(chǎn)品作用溫和，不含有毒有味的巰基乙醇，在不影響目的蛋白的情況下，可使同一張印跡膜進(jìn)行多次抗體檢測(cè)。省去反復(fù)電泳和轉(zhuǎn)膜等步驟，節(jié)省樣品及時(shí)間，加快Western Blot檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。 產(chǎn)品特色 ? 獨(dú)有的配方，去除抗體效力強(qiáng) ? 對(duì)蛋白作用溫和，不影響目的蛋白 ? 不含有巰基乙醇，無(wú)毒無(wú)味，室溫條件下使用保存 ? 適用PVDF膜和NC膜，加速抗體檢測(cè) 操作步驟 1. 將曝光結(jié)束的蛋白印跡膜充分浸入適當(dāng)體積的NCM Western BlotStripping Buffer（蛋白印跡膜再生液/抗體剝離液）中，抗體剝離液要充分覆蓋膜的表面，在脫色搖床上，室溫中速震蕩孵育10分鐘，棄去剝離液。 2. （可選）重復(fù)步驟1。（對(duì)于信號(hào)正常或較弱的印跡膜也可以不必重復(fù)步驟1，如果是內(nèi)參等表達(dá)量高的蛋白，可以重復(fù)步驟1三次，以保證徹底去除了抗體。） 3. 每用鑷子取出印跡膜，加入洗滌緩沖液TBST或PBST，在脫色搖床上中速震蕩洗滌3次，每次5分鐘。 4. (可選)通過(guò)顯色曝光等方法檢測(cè)抗體是否去除，如檢測(cè)到信號(hào)，需重復(fù)步驟1，確?？贵w被除盡。 5. 對(duì)印跡膜重新進(jìn)行封閉，進(jìn)入下一輪Western Blot 實(shí)驗(yàn)。 保存條件 室溫保存，運(yùn)輸，一年有效 注意事項(xiàng) 1. 建議先檢查表達(dá)量低的蛋白，再用NCM Western Blot Stripping Buffer處理印跡膜后，檢測(cè)表達(dá)量高的蛋白； 2. 本品適用于NC膜和PVDF膜，推薦使用PVDF膜，效果更佳； 3. 為了安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，戴手套操作
NCM/新賽美 磷酸酶抑制劑混合液
基本售價(jià)：249.00元
產(chǎn)品介紹 新賽美生物的磷酸酶抑制劑混合液（ProtLytic Phosphatase Inhibitor Cocktail）是經(jīng)優(yōu)化好的多種 磷酸酶抑制劑的混合物組成的，是一種廣譜的抑制劑混合物，在抽提和純化蛋白時(shí)能夠 有效防止蛋白被內(nèi)源性的磷酸酶降解。成分主要含有 sodium fluoride，sodium orthovanadate，Sodium Pyrophosphate，β-glycerophosphate，Imidazole 等多種抑制劑， 主要抑制酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、ATP 酶等，用于蛋白純化，蛋白免疫印跡, 免疫共 沉淀，免疫熒光，免疫組織化學(xué)，激酶測(cè)定等研究。 操作步驟 將磷酸酶抑制劑混合液，根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系的需求，按照 1:100 的比率將其加入到樣品 溶液中（如組織抽提物或細(xì)胞裂解物）。 保存條件 4 ℃保存，冰袋運(yùn)輸，至少 1 年有效； 注意事項(xiàng) 1. 磷酸酶抑制劑會(huì)損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚，吸入、吞進(jìn)或通過(guò)皮膚吸收后有致命危 險(xiǎn) 2. 不同樣品中含有的磷酸酶量及種類(lèi)不同，可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整加入磷酸酶抑制劑混合液 的量，如加入 2 倍，3 倍等量，才能有效抑制內(nèi)源性磷酸酶的作用 3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴防護(hù)手套操作
NCM/新賽美 蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合液
基本售價(jià)：399.00元
產(chǎn)品介紹 新賽美生物的蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合液（Protease and PhosphataseInhibitor Cocktail） 是經(jīng)優(yōu)化好的多種蛋白酶和磷酸酶抑制劑的混合物組成的，僅用一種溶液即可方便地完 成在抽提和純化蛋白時(shí)，能夠有效防止蛋白被內(nèi)源性的蛋白酶和磷酸酶的降解。成分含 有 Aprotinin，Bestatin，Leupetin，Pepstatin，PMSF，NaF，Sodium Orthovanadate，Sodium Pyrophosphate 等多種蛋白酶和磷酸酶家族的抑制劑，主要抑制氨基肽酶、半胱氨酸和 絲氨酸蛋白酶、絲氨酸/蘇氨酸和酪氨酸蛋白酶和磷酸酶、蛋白酪氨酸磷酸酶、堿性磷 酸酶、酸性磷酸酶等，用于蛋白純化，蛋白免疫印跡, 免疫共沉淀，免疫熒光，免疫組 織化學(xué)，激酶測(cè)定等研究。 操作步驟 在室溫下溶解含有蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合液，混勻之后，根據(jù)實(shí)驗(yàn)體系的需求， 按照 1:100 的比率將抑制劑混合液加入到樣品溶液中（如組織抽提物或細(xì)胞裂解物）。 保存條件 -20 ℃保存，冰袋運(yùn)輸，至少 1 年有效； 注意事項(xiàng) 1. 蛋白酶和磷酸酶抑制劑嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚，吸入、吞進(jìn)或通過(guò)皮膚吸收 后有致命危險(xiǎn)； 2. 不同樣品中含有的蛋白酶和磷酸酶的量及種類(lèi)不同，可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)調(diào)整加入抑制劑混 合液的量，如加入 2 倍，3 倍等量，才能有效抑制內(nèi)源性蛋白酶和磷酸酶的作用 3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴防護(hù)手套操作
NCM/新賽美 RIPA裂解液
基本售價(jià)：199.00元
產(chǎn)品介紹 RIPA 即 Radio Immunoprecipitation Assay，是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。新賽美生物的 RIPA 裂解液裂解所得的蛋白樣品可以用于常規(guī)的 Western、IP 等。主要成分是：50mMTris(pH 7.6)，150mM NaCl，1% NP-40，0.5% sodiumdeoxycholate，0.1% SDS 等多種裂解劑和抑制劑，能有效地抑制蛋白 降解。 操作步驟 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞樣品： 1. 取適當(dāng)量的NCM RIPA Buffer 裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF，使PMSF的最終濃度為1mM。 注意：NCM RIPA Buffer 不含蛋白酶等抑制劑，根據(jù)需要在使用前添加蛋白酶，磷酸酶等抑制劑。 2. a.對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒(méi)有 干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使 裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 b. 對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。 如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管，然后再裂解。 對(duì)于組織樣品： 1. 把組織剪切成細(xì)小的碎片。 2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當(dāng)量的裂解液，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF，使 PMSF 的最終濃 度為 1mM。 3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加 更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量) 4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。 5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、Western 和免疫沉淀 等操作。 6. 如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過(guò)強(qiáng)烈渦旋使樣品裂解 充分。然后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn) 是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。 保存條件 4℃保存，室溫運(yùn)輸，1 年有效； 注意事項(xiàng)： 1.RIPA 裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物，屬正?，F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因 組 DNA 等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組 DNA 結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下，可以直接離心取上清 用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白，則可以通過(guò)超聲處理打碎打散該透明 膠狀物，隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見(jiàn)的轉(zhuǎn)錄因子，例如 NFκB、p53 等時(shí)，通 常不必進(jìn)行超聲處理，就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。 2．為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)效果，可適當(dāng)分裝使用，以盡量避免反復(fù)凍融。 3．PMSF 應(yīng)現(xiàn)用現(xiàn)加,需自備 PMSF。 4．裂解蛋白的所有步驟都需在冰上或 4℃進(jìn)行。 5．蛋白酶抑制劑均有較高的毒性，為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。一旦 直接接觸，請(qǐng)立即用流水沖洗，再向醫(yī)療保健結(jié)構(gòu)咨詢(xún)。
NCM/新賽美 Cell Counting Kit-8-5000T
基本售價(jià)：2499.00元
產(chǎn)品介紹 Cell Counting Kit-8簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8試劑盒，是MTT，XTT等的替代方法，一種基于WST-8（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中，不需要預(yù)配各種成分。WST-8在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線(xiàn)粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的Formazan。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺(生成的Formazan量)和細(xì)胞數(shù)目呈線(xiàn)性關(guān)系?？捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖和毒性測(cè)定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)。 操作步驟 一. 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)（測(cè)定細(xì)胞具體數(shù)量） 1.先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞； 2.按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個(gè)細(xì)胞濃度梯度，一般要做4-7個(gè)細(xì)胞濃度梯度，每組3-6個(gè)復(fù)孔； 3.接種后培養(yǎng)2-4小時(shí)使細(xì)胞貼壁，然后加入CCK-8試劑（按每100 μL培養(yǎng)基加10μL CCK-8）培養(yǎng)一定時(shí)間后測(cè)定OD值，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可以測(cè)定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量。（使用此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的前提條件是試驗(yàn)條件完全一致） 二. 細(xì)胞活性檢測(cè) 1.在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100μL/孔)，將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)一段時(shí)間； 2.向每孔加入10μL的CCK-8溶液(注意不要產(chǎn)生氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù))； 3.將培養(yǎng)板置于培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)； 4.用酶標(biāo)儀測(cè)定在450 nm處的吸光度。 三.細(xì)胞增殖-毒性檢測(cè) 1.在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100μL/孔)，將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)； 2.向培養(yǎng)板加入不同濃度的待測(cè)藥物； 3.將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間； 4.向每孔加入10μL的CCK-8溶液(注意不要產(chǎn)生氣泡)； 5.將培養(yǎng)板置于培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)； 6.用酶標(biāo)儀測(cè)定在 450 nm 處的吸光度。 注意：如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話(huà)，可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次， 然后加入新的培養(yǎng)基），去掉藥物影響。當(dāng)然藥物影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。 四.活力計(jì)算 細(xì)胞存活率*（%）=[(As-Ab) / (Ac-Ab)] × 100% 抑制率*（%）=[(Ac-As) / (Ac-Ab)] × 100% As:實(shí)驗(yàn)孔吸光度(含細(xì)胞、培養(yǎng)基、CCK-8 溶液和藥物溶液)； Ac: 對(duì)照孔吸光度 (含細(xì)胞、培養(yǎng)基、CCK-8 溶液，不含藥物) ； Ab: 空白孔吸光度 (含培養(yǎng)基、CCK-8 溶液，不含細(xì)胞、藥物) 。 保存條件 4℃避光保存，有效期12個(gè)月；-20℃避光保存，有效期24個(gè)月 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用 1. 細(xì)胞增殖測(cè)定：CCK-8是水溶性的，在培養(yǎng)基中穩(wěn)定且無(wú)毒。 2. 細(xì)胞活性分析，包括細(xì)胞毒性：代謝活性以及染料的形成與細(xì)胞的活性和損傷成比例。 3. 細(xì)胞因子分析：測(cè)定細(xì)胞因子誘導(dǎo)的增殖，必要時(shí)，可在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)回收和擴(kuò)增細(xì)胞 注意事項(xiàng) 1.CCK-8的培養(yǎng)時(shí)間一般為1-4小時(shí)，但在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度，根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定，需要摸索條件，CCK-8的最佳反應(yīng)時(shí)間以具體顯色的最佳時(shí)間為準(zhǔn)。 2.使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)問(wèn) 題。一方面，由于96孔板周?chē)蝗ψ钊菀渍舭l(fā)，可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法，改加相同量的PBS,水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。 3.本試劑盒的檢測(cè)依賴(lài)于脫氫酶催化的反應(yīng)，所以還原劑 (例如一些抗氧化劑)會(huì)干擾檢測(cè)，如果待檢測(cè)體系中存在較多的還原劑，需設(shè)法去除。用酶標(biāo)儀檢測(cè)前需確保每個(gè)孔內(nèi)沒(méi)有氣泡，否則會(huì)干擾測(cè)定。 4.加入藥物中如含有金屬，對(duì) CCK-8 顯色有影響。終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)抑制5%,15%,90% 的顯色反應(yīng)，使靈敏度降低。如果終濃度是10mM的話(huà)，將會(huì)100% 抑制。 5.培養(yǎng)基中的酚紅不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí)，通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響。 6.本產(chǎn)品可以檢測(cè)革蘭氏陰性細(xì)菌，但不能檢測(cè)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和酵母細(xì)胞。向100μL培養(yǎng)液中加入10μL CCK-8溶液，并培養(yǎng)1-4小時(shí)或過(guò)夜。 7.CCK-8試劑對(duì)細(xì)胞的毒性非常低。它和活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶持續(xù)反應(yīng)使溶液顏色不斷加深，OD值不斷增加(注: 活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶是持續(xù)產(chǎn)生的)。 8.要測(cè)定細(xì)胞的具體數(shù)量，建議同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。 9.建議采用多通道移液器，以減小平行孔間的差異。 10.以下方法可以終止CCK-8反應(yīng)(96 孔板)：(a).在顯色反應(yīng)后，將培養(yǎng)板放置4°C冰箱內(nèi)。(b).每孔加10μL 0.1M HCl溶液。(c).每孔加10μL 1% (w/v) 的SDS (十二烷基硫酸鈉)溶液。注意：反應(yīng)停止后，應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)測(cè)定。 11. 本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。 12. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
CM/新賽美 Cell Counting Kit-8-500T
基本售價(jià)：299.00元
產(chǎn)品介紹 Cell Counting Kit-8簡(jiǎn)稱(chēng)CCK-8試劑盒，是MTT，XTT等的替代方法，一種基于WST-8（水溶性四唑鹽，化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)胞樣品中，不需要預(yù)配各種成分。WST-8在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線(xiàn)粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的Formazan。對(duì)于同樣的細(xì)胞，顏色的深淺(生成的Formazan量)和細(xì)胞數(shù)目呈線(xiàn)性關(guān)系?？捎糜谒幬锖Y選、細(xì)胞增殖和毒性測(cè)定、腫瘤藥敏等試驗(yàn)。 操作步驟 一. 制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)（測(cè)定細(xì)胞具體數(shù)量） 1.先用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞； 2.按比例依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個(gè)細(xì)胞濃度梯度，一般要做4-7個(gè)細(xì)胞濃度梯度，每組3-6個(gè)復(fù)孔； 3.接種后培養(yǎng)2-4小時(shí)使細(xì)胞貼壁，然后加入CCK-8試劑（按每100 μL培養(yǎng)基加10μL CCK-8）培養(yǎng)一定時(shí)間后測(cè)定OD值，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可以測(cè)定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量。（使用此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的前提條件是試驗(yàn)條件完全一致） 二. 細(xì)胞活性檢測(cè) 1.在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100μL/孔)，將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)一段時(shí)間； 2.向每孔加入10μL的CCK-8溶液(注意不要產(chǎn)生氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù))； 3.將培養(yǎng)板置于培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)； 4.用酶標(biāo)儀測(cè)定在450 nm處的吸光度。 三.細(xì)胞增殖-毒性檢測(cè) 1.在96孔板中接種細(xì)胞懸液(100μL/孔)，將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)； 2.向培養(yǎng)板加入不同濃度的待測(cè)藥物； 3.將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間； 4.向每孔加入10μL的CCK-8溶液(注意不要產(chǎn)生氣泡)； 5.將培養(yǎng)板置于培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)； 6.用酶標(biāo)儀測(cè)定在 450 nm 處的吸光度。 注意：如果待測(cè)物質(zhì)有氧化性或還原性的話(huà)，可在加 CCK-8 之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次， 然后加入新的培養(yǎng)基），去掉藥物影響。當(dāng)然藥物影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入藥物后的空白吸收即可。 四.活力計(jì)算 細(xì)胞存活率*（%）=[(As-Ab) / (Ac-Ab)] × 100% 抑制率*（%）=[(Ac-As) / (Ac-Ab)] × 100% As:實(shí)驗(yàn)孔吸光度(含細(xì)胞、培養(yǎng)基、CCK-8 溶液和藥物溶液)； Ac: 對(duì)照孔吸光度 (含細(xì)胞、培養(yǎng)基、CCK-8 溶液，不含藥物) ； Ab: 空白孔吸光度 (含培養(yǎng)基、CCK-8 溶液，不含細(xì)胞、藥物) 。 保存條件 4℃避光保存，有效期12個(gè)月；-20℃避光保存，有效期24個(gè)月 實(shí)驗(yàn)應(yīng)用 1. 細(xì)胞增殖測(cè)定：CCK-8是水溶性的，在培養(yǎng)基中穩(wěn)定且無(wú)毒。 2. 細(xì)胞活性分析，包括細(xì)胞毒性：代謝活性以及染料的形成與細(xì)胞的活性和損傷成比例。 3. 細(xì)胞因子分析：測(cè)定細(xì)胞因子誘導(dǎo)的增殖，必要時(shí)，可在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)回收和擴(kuò)增細(xì)胞 注意事項(xiàng) 1.CCK-8的培養(yǎng)時(shí)間一般為1-4小時(shí)，但在培養(yǎng)30分鐘左右即可取出肉眼觀察顯色程度，根據(jù)細(xì)胞種類(lèi)而定，需要摸索條件，CCK-8的最佳反應(yīng)時(shí)間以具體顯色的最佳時(shí)間為準(zhǔn)。 2.使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)問(wèn) 題。一方面，由于96孔板周?chē)蝗ψ钊菀渍舭l(fā)，可以采取棄用周?chē)蝗Φ霓k法，改加相同量的PBS,水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。 3.本試劑盒的檢測(cè)依賴(lài)于脫氫酶催化的反應(yīng)，所以還原劑 (例如一些抗氧化劑)會(huì)干擾檢測(cè)，如果待檢測(cè)體系中存在較多的還原劑，需設(shè)法去除。用酶標(biāo)儀檢測(cè)前需確保每個(gè)孔內(nèi)沒(méi)有氣泡，否則會(huì)干擾測(cè)定。 4.加入藥物中如含有金屬，對(duì) CCK-8 顯色有影響。終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會(huì)抑制5%,15%,90% 的顯色反應(yīng)，使靈敏度降低。如果終濃度是10mM的話(huà)，將會(huì)100% 抑制。 5.培養(yǎng)基中的酚紅不會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，酚紅的吸光度可以在計(jì)算時(shí)，通過(guò)扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不會(huì)對(duì)檢測(cè)造成影響。 6.本產(chǎn)品可以檢測(cè)革蘭氏陰性細(xì)菌，但不能檢測(cè)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和酵母細(xì)胞。向100μL培養(yǎng)液中加入10μL CCK-8溶液，并培養(yǎng)1-4小時(shí)或過(guò)夜。 7.CCK-8試劑對(duì)細(xì)胞的毒性非常低。它和活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶持續(xù)反應(yīng)使溶液顏色不斷加深，OD值不斷增加(注: 活細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶是持續(xù)產(chǎn)生的)。 8.要測(cè)定細(xì)胞的具體數(shù)量，建議同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。 9.建議采用多通道移液器，以減小平行孔間的差異。 10.以下方法可以終止CCK-8反應(yīng)(96 孔板)：(a).在顯色反應(yīng)后，將培養(yǎng)板放置4°C冰箱內(nèi)。(b).每孔加10μL 0.1M HCl溶液。(c).每孔加10μL 1% (w/v) 的SDS (十二烷基硫酸鈉)溶液。注意：反應(yīng)停止后，應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)測(cè)定。 11. 本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。 12. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
NCM/新賽美 水浴鍋抑菌劑
基本售價(jià)：399.00元
產(chǎn)品介紹 WaterBathCleaner（水浴鍋抑菌劑）是一種即用型的，專(zhuān)門(mén)用于清除和抑制水浴鍋中細(xì) 菌、真菌、支原體等微生物清除的一款產(chǎn)品。本品主要成分是一種陽(yáng)離子表面活性劑， 系廣譜殺菌劑，能改變細(xì)菌胞漿膜通透性，使菌體胞漿物質(zhì)外滲，阻礙其代謝而起殺滅 作用。能夠有效清除細(xì)胞培養(yǎng)的各類(lèi)細(xì)菌、真菌、支原體等微生物，尤其對(duì)水中的細(xì)菌、 真菌及其芽孢和孢子抑制可長(zhǎng)達(dá) 7天。 產(chǎn)品特色 ? 安全性：使用濃度下對(duì)皮膚和組織無(wú)刺激性，無(wú)任何不良反應(yīng) ? 高效廣譜殺菌劑，對(duì)細(xì)菌、真菌、支原體等殺力強(qiáng) ? 對(duì)金屬、橡膠制品無(wú)腐蝕作用 ? 安全長(zhǎng)效，抑制效果長(zhǎng)達(dá) 7天 操作步驟 1.本品水浴鍋抑菌劑以 1000倍的濃縮液形式提供，初次使用建議先清潔水浴鍋， 2.然后直接按照 1:1000的比例向水浴鍋中加入本品 保存條件 室溫保存運(yùn)輸，至少 1年有效； 注意事項(xiàng) 1.本品僅供科研使用，勿做其他用途 2.使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū) 3.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
NCM/新賽美 超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒
基本售價(jià)：459.00元
產(chǎn)品介紹 NcmECL Ultra是新賽美生物科技有限公司研發(fā)的超敏ECL（Enhanced Chemiluminescent） 化學(xué)發(fā)光試劑，用于檢測(cè) HRP（辣根過(guò)氧化物酶）標(biāo)記的目的條帶，檢測(cè)靈敏度最高可達(dá)飛 克（fg）級(jí)。NcmECL Ultra 優(yōu)化了底物的成分，應(yīng)用了新型的 Enhancer 和氧化劑，發(fā)光強(qiáng)度 更高，穩(wěn)定性更好，不含有毒試劑，安全性更高。 產(chǎn)品特色 ? 高靈敏度：最高可達(dá)飛克級(jí)別，10-15 g ? 安全性高：試劑不含對(duì)人體健康有毒的化學(xué)物質(zhì) ? 信號(hào)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)：發(fā)光時(shí)間長(zhǎng)達(dá) 30 分鐘以上 ? 穩(wěn)定性高：室溫運(yùn)輸穩(wěn)定性好 ? 經(jīng)濟(jì)節(jié)約：較同類(lèi)進(jìn)口試劑花費(fèi)更少，所需抗體少，抗體稀釋度高 操作步驟 1. 準(zhǔn)備工作稀釋液，將 NcmECL Ultra Luminol/Enhancer Reagent (A) 和 NcmECL Ultra Stabilized Peroxide Reagent (B) 按體積比例 1:1 混合 注：為了獲得最佳效果，使用前準(zhǔn)備稀釋液并立即使用。吸取 NcmECL Ultra 不同 組份時(shí)要換移液管，以免污染試劑。 2. 從 TBST 或 PBST 緩沖液的托盤(pán)中取出膜，小心移去膜上的多余緩沖液，但不要讓膜干燥。 3. 將膜上有蛋白的一面朝上平整地鋪在一張紙板上，加上配好的工作稀釋液。用量以覆 蓋膜為基準(zhǔn)，1ml 工作液可以覆蓋大約 10cm2的膜。 4. 將膜與工作稀釋液孵育 1-5min，以確保整個(gè)表面覆蓋。 5. 通過(guò)放射自顯影膠片或成像設(shè)備獲取信號(hào)。對(duì)于一個(gè)未知的信號(hào)，可調(diào)節(jié)不同曝光的 時(shí)間來(lái)獲得最佳結(jié)果。 保存條件 室溫運(yùn)輸，請(qǐng)于 4℃保存，有效期為 2 年。
NCM/新賽美 超敏ECL化學(xué)發(fā)光試劑盒
基本售價(jià)：1600.00元
產(chǎn)品介紹 NcmECL Ultra是新賽美生物科技有限公司研發(fā)的超敏ECL（Enhanced Chemiluminescent） 化學(xué)發(fā)光試劑，用于檢測(cè) HRP（辣根過(guò)氧化物酶）標(biāo)記的目的條帶，檢測(cè)靈敏度最高可達(dá)飛 克（fg）級(jí)。NcmECL Ultra 優(yōu)化了底物的成分，應(yīng)用了新型的 Enhancer 和氧化劑，發(fā)光強(qiáng)度 更高，穩(wěn)定性更好，不含有毒試劑，安全性更高。 產(chǎn)品特色 ? 高靈敏度：最高可達(dá)飛克級(jí)別，10-15 g ? 安全性高：試劑不含對(duì)人體健康有毒的化學(xué)物質(zhì) ? 信號(hào)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)：發(fā)光時(shí)間長(zhǎng)達(dá) 30 分鐘以上 ? 穩(wěn)定性高：室溫運(yùn)輸穩(wěn)定性好 ? 經(jīng)濟(jì)節(jié)約：較同類(lèi)進(jìn)口試劑花費(fèi)更少，所需抗體少，抗體稀釋度高 操作步驟 1. 準(zhǔn)備工作稀釋液，將 NcmECL Ultra Luminol/Enhancer Reagent (A) 和 NcmECL Ultra Stabilized Peroxide Reagent (B) 按體積比例 1:1 混合 注：為了獲得最佳效果，使用前準(zhǔn)備稀釋液并立即使用。吸取 NcmECL Ultra 不同 組份時(shí)要換移液管，以免污染試劑。 2. 從 TBST 或 PBST 緩沖液的托盤(pán)中取出膜，小心移去膜上的多余緩沖液，但不要讓膜干燥。 3. 將膜上有蛋白的一面朝上平整地鋪在一張紙板上，加上配好的工作稀釋液。用量以覆 蓋膜為基準(zhǔn)，1ml 工作液可以覆蓋大約 10cm2的膜。 4. 將膜與工作稀釋液孵育 1-5min，以確保整個(gè)表面覆蓋。 5. 通過(guò)放射自顯影膠片或成像設(shè)備獲取信號(hào)。對(duì)于一個(gè)未知的信號(hào)，可調(diào)節(jié)不同曝光的 時(shí)間來(lái)獲得最佳結(jié)果。 保存條件 室溫運(yùn)輸，請(qǐng)于 4℃保存，有效期為 2 年。
NCM/新賽美 無(wú)血清細(xì)胞凍存液
基本售價(jià)：399.00元
產(chǎn)品介紹 CELLSAVINGTM是一種無(wú)血清細(xì)胞凍存液，通用于各種動(dòng)物細(xì)胞株（腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞）， 凍存細(xì)胞可在-80℃長(zhǎng)期保存（>5 年）。CELLSAVINGTM配方成分明確，不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白， 不含血清，可減少各類(lèi)細(xì)菌、病毒和支原體等污染，保證凍存細(xì)胞的安全。該凍存液含 DMSO、 葡萄糖等各種細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)成分，提高細(xì)胞存活率和活力，亦適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá) 細(xì)胞。 產(chǎn)品特色 ? 即用型細(xì)胞凍存液 ? 直接凍存于-80℃冰箱，長(zhǎng)期保存（>5 年），不需要程序性降溫 ? 高安全性，病毒、病菌和支原體等污染可能性低 ? 細(xì)胞存活率和活力高，批次性差異小 操作步驟 細(xì)胞凍存步驟 1. 常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞于試管中。 2. 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存細(xì)胞數(shù)。 3. 將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中，1000rmp，5 分鐘離心收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀，徹底 棄去離心管中的上清液。 4. 加入適量的 CELLSAVINGTM 細(xì)胞凍存液于離心管中，使細(xì)胞濃度約為 5×105-1×107 /ml。輕 柔地混勻細(xì)胞，制成細(xì)胞混合液。 5. 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中，建議每管 1ml 或 1.5ml。 6. 直接將分裝好的細(xì)胞凍存管放入-80℃超低溫冰箱中，可長(zhǎng)期冷凍保存。 7. 如果想液氮中長(zhǎng)期保存，需先放入-80℃冰箱至少一天時(shí)間，方可移至液氮罐中保存。 凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟 1. 從冰箱中取出凍存的細(xì)胞，立即放入 37℃水浴槽中快速解凍。 2. . 待凍存管中細(xì)胞混合液完全融化后，立即加入 1ml 細(xì)胞培養(yǎng)基于冷凍管中與細(xì)胞混合， 將其中的混合液移至含有約 5ml 該細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中，1000rmp，5 分鐘離心收集凍 存細(xì)胞沉淀，移去上清液（操作時(shí)小心，切勿將細(xì)胞沉淀移去）。 3. 加入適量的新鮮細(xì)胞培養(yǎng)基，使用移液管緩緩加入到細(xì)胞沉淀，輕柔地混勻，將細(xì)胞混 合液移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。 4. 鏡檢細(xì)胞后，可根據(jù)各自研究的需要和方法經(jīng)行細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)。 保存條件 常溫運(yùn)輸，4℃保存，長(zhǎng)期不用，-20℃保存，有效期 36 個(gè)月 質(zhì)量保障 CELLSAVINGTM細(xì)胞凍存液經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的內(nèi)毒素、滲透壓、病原體和 pH 檢驗(yàn)，確保產(chǎn)品 不含病菌、病毒以及支原體等。用于常規(guī)的細(xì)胞凍存，-80℃可長(zhǎng)期保存（>5 年），細(xì)胞 存活率在 90-98%。 注意事項(xiàng) 1.CELLSAVING TM 在凍存細(xì)胞分裝后，應(yīng)減少在外存放時(shí)間，盡快移入到-80 ℃超低溫 冰箱。 2.對(duì)于干細(xì)胞（ES 細(xì)胞）等凍存時(shí)，我們建議用戶(hù)在使用前，事先對(duì)所凍存的胞進(jìn)行 至少為期 1 周的該產(chǎn)品試驗(yàn)性細(xì)胞冷凍保存培養(yǎng)，確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存。 3. CELLSAVINGTM含有 10%DMSO，部分對(duì) DMSO 敏感的細(xì)胞，建議對(duì)其進(jìn)行至少 1 周 的本產(chǎn)品試驗(yàn)性的細(xì)胞凍存培養(yǎng)，確認(rèn)性能后再正式凍存。 免責(zé)聲明: 本公司將不為任何不正常使用此產(chǎn)品時(shí)所發(fā)生的意外負(fù)責(zé)
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